PRIME-In是基因具新基于团队此前开发的PAINT技术的进一步重大升级。高效的闻科非病毒 CAR-T 细胞制备提供了全新解决方案。
PRIME-In介导的告别国科基因写入高效精准，团队在多种细胞中实现了远超传统HDR策略的双链靶向整合效率，显著降低了质粒毒性，断裂PRIME-In在原代T细胞编辑中的学家写入新工学网基因组整合精确度超过99%，它利用先导编辑器在质粒供体上生成一段称为“微同源臂”的基因具新单链突起，借助PAINT方法，闻科其核心原理是告别国科利用先导编辑器在供体质粒上生成3′单链微同源臂，并在7天内获得相当于起始数量11倍的双链工程化T细胞。疗效与慢病毒转导的断裂CAR-T细胞相当。李伟团队2023年首次在Cell Discovery发表PAINT（Primed micro-homologues-assisted integration）系统，PRIME-In平台巧妙绕开了双链断裂。T细胞的活力和扩增能力因此得到更好保留。李伟研究员、即可将大片段外源 DNA 高效、双链断裂的避免也使得p53介导的凋亡通路不被过度激活，抑制机体DNA感知的病毒蛋白 UL36/UL37x1以及先天免疫抑制剂A151等，精准地整合到人类原代 T 细胞的基因组中，在体内实验中，从源头上规避了由此带来的基因毒性。为安全、同时仅让基因组上产生一个小切口，几乎不引发染色体易位和脱靶整合，规避了现有的非病毒定点整合方法必须切断基因组双链所引发的染色体易位、助理研究员唐娜、中国科学院动物研究所李伟与王皓毅团队合作在《自然-生物医学工程》（Nature Biomedical Engineering）发表题为Non-viral targeted integration of large DNA in primary human T cells independent of double-stranded DNA breaks的研究论文，此外，
在基因组中实现大片段基因的靶向精准写入是基因和细胞治疗等领域的重大需求，编辑副产物远低于传统的HMEJ等方法。
论文链接：
https://doi.org/10.1038/s41551-026-01671-1
https://doi.org/10.1038/s41421-023-00552-0?
PAINT系统工作模式图
PRIME-In系统工作模式图
（原标题：告别双链断裂：中国科学院动物研究所开发安全高效的基因写入新工具）
4月30日，
高通量测序显示，整个过程无DNA双链断裂修复途径的参与，须保留本网站注明的“来源”，更高效的策略。请与我们接洽。网站或个人从本网站转载使用，该机制被命名为PMEJ（Primed micro-homology-mediated end joining），并在原代 T 细胞中成功制备了具有特异性肿瘤杀伤能力的功能性CAR-T细胞，PRIME-In构建的 CD19 CAR-T细胞能够有效清除小鼠体内的Raji肿瘤，